高速逆流色譜儀在行業(yè)應用中有什么技術特點?
發(fā)布時間:2019-07-10 點擊次數(shù):1059次
高速逆流色譜儀是一種新的液相色譜技術,利用液液兩相的逆流分配,在沒有固體填料的情況下,實現(xiàn)復雜的化學物質的混合物分離。它以液體溶劑為固定相,替代了傳統(tǒng)的制備型液相色譜填充柱,和另一液體溶劑做流動相在一個高性能的離心系統(tǒng)內進行操作。不需使用固態(tài)固定相,而是利用離心力產(chǎn)生的恒定力將固定相保留在由管道連接的一系列的腔體中。
高速逆流色譜儀的原理:
高速逆流色譜儀是一種新的液相色譜技術,利用液液兩相的逆流分配,在沒有固體填料的情況下,實現(xiàn)復雜的化學物質的混合物分離。它以液體溶劑為固定相,替代了傳統(tǒng)的制備型液相色譜填充柱,和另一液體溶劑做流動相在一個高性能的離心系統(tǒng)內進行操作。不需使用固態(tài)固定相,而是利用離心力產(chǎn)生的恒定力將固定相保留在由管道連接的一系列的腔體中。傳統(tǒng)固態(tài)填充柱的分離量一般為2%-7%的固定相重量中,嚴重限制了它的分離能力,而在HPCPC系統(tǒng)中該列包含50%-80%于固定相中,分離能力大大提高。
1、操作簡便,容易掌握:儀器操作簡單,對樣品的預處理要求低,一般的粗提物即可進行的制備分離或分析。
2、重現(xiàn)性好:如果樣品不具有較強的表面活性作用,酸堿性也不強,即使多次進樣,其分離過程都保持很穩(wěn)定,而且重現(xiàn)性相當好。
3、分離效率高,分離量較大:由于其與一般的色譜分離方式不同,能實現(xiàn)梯度洗脫和反相洗脫,亦能進行重復進樣,使其特別適用于制備性分離,產(chǎn)品純度高,制備量大。
4、回收率高:不需要固相載體,消除了由于樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解造成的損失,理論上樣品的回收率可達。在實驗中只要調整好分離條件,一般都有很高的回收率。
5、應用范圍廣,適應性好:由于溶劑系統(tǒng)的組成及配比可以是無限多的,因而從理論上講可以適用于任何極性范圍內樣品的分離,在分離天然化合物方面具有其獨到之處。由于聚四氟乙烯管中的固定相為液體不需要固相載體,因而可以消除固-液色譜中由于使用固相載體而帶來的吸附損失,特別適用于分離極性物質。
6、分配系數(shù):溶劑系統(tǒng)的選擇是同時選擇色譜分離過程的兩相,是對樣品成功分離的關鍵所在,而樣品中各組分的分配系數(shù)決定著這種溶劑系統(tǒng)是否合適,因此分配系數(shù)的測定是選擇溶劑系統(tǒng)的重要環(huán)節(jié)。目前,分配系數(shù)的測定多采用薄層色譜法、毛細管電泳法、HPLC法、生物活性分配比率法及分析型HSCCC法。